博士日记 29 - qPCR 和慢病毒包装感恩节日记画展日记

时间:2024-06-30 05:34:24 作者:小编 字数:5905字

图片 | 我不应该为这张照片感到自豪吗?

昨天我兴奋极了,这种兴奋一直持续到回家。陈老板问我为什么这么高兴。我回答说:因为公司的技术顾问从理论到实践,深入细致地教了我如何做高质量的qPCR,而且他们的产品省时省力。

说完这句话,我甚至有些难以置信,我只在陈老板发短信提醒我工资奖金到账时高兴了短暂的一瞬,就因为学会了一个实验,而高兴了那么久,那么强烈。

我感觉自己是真的跟世界脱节了,我最后一次机会可以释放我的精力和时间了。我想我有两个选择:1、去临床学技术,赚钱。因果是肯定的,我肯定会有技术,赚到比现在更多的钱,但是我可能不喜欢,会厌倦和它打交道。2、做实验。因果是不确定的,我可能花了钱,花了精力,最后却一无所获,没有持续的科研训练,半途而废,不能全心全意做学生,注定我不会有很精湛的实验技术。最后的结果也是不确定的,我可能毕业不了,没有文章,花了不少钱,但将来却没有机会用它赚钱。即便如此,我还是选择了后者。

虽然过程百感交集,还没有体会到科研实验的深刻痛苦,但是买到好的产品,学到高质量的实验操作,这份幸福感是持久的,我觉得我喜欢。

很感恩自己有环境可以自己喜欢不喜欢来做选择,总是在选择和放弃之间徘徊,以至于现在的我没有任何执着的专业技能,真不知道自己还剩下多少时间去积累专业技能,当然,不思得失,就没有得失,还是很感恩的。

昨天我接受培训的这家核酸生物公司叫艾克瑞。我并没有抱太大的期望,因为从来没有一次培训收获这么大。技术顾问无论是讲课还是实验,都是一个很有经验的人,而且表达能力很强。她讲的东西我都能听懂,也解决了我之前很多的困惑。关于讲课,最重要的是“讲”,就是要讲清楚,讲给别人听,这一点很多人很难做到,因为他们以为自己懂了别人就能听懂,这样很不好。

难怪三体人的沟通如此高效,语言有时候真的很低效。

之后老师会一步步指导你完成实验,详细到如何分区域,如何给枪消毒,如何加入微量样品保证稳定性,试剂的稳定性需要哪些准备步骤,如何混匀,如何戳破气泡等。

我以前从来没想过自己会学到这么多东西,甚至还忽略了指导实验的部分,因为所有试剂或盒子都有非常详细的说明,我以为只要按照说明做就行了。但经验是很难学的。

因为我自己也在做,所以看到如此简便高效的提取方法,心里非常激动,得到的核酸纯度和浓度都那么好,扩增曲线也有漂亮的峰。

到目前为止,我从未独立做过 qPCR,但我感觉我在这方面很擅长。

上次说我遇到了一个重要的人,毫无疑问非常重要。没有他,我很难学会如何包装慢病毒、扩增质粒、进行慢病毒转染。目前我们组里只有一个人有这样的经验和能力,就是前面老师提到的那个被老师高度赞扬的师弟,但他不可能一步一步地教我。

只有进过实验室的人,才知道什么叫“手拉手”。首先,要有相互的责任。前辈负责把自己在实验上的经验传授给后辈,后辈负责把前辈交办的一切工作做好。互利互惠,传承就是这样传承下来的。

“我好夸你”师弟没有这样的实验,所以不能替我做。 “我好夸你”师弟有种文采,我一个人,所以最多只有一问一答的关系。我总不能从早到晚都呆在实验室里,有事就来,没事就走,所以总不能巧遇上他们的实验操作,如果晚上做他们的实验操作,我也见不到。

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因此,我几乎不可能被人一步步指导,大多数实验都是半成品,我只是知道大概怎么做。

因此我根本不可能学会如何建立稳定表达细胞系,这是一个复杂而漫长的过程,涉及到所有新的东西,更不可能自己去包装慢病毒。

我的“不可能”可能有些绝对,但我还是觉得,对于很多人来说,花钱找人帮你做实验很容易,但对于我来说很难。对于研究生来说,更难的是找个人教你做实验,分享经验。

可见那位重要的班长对我有多重要。他不做实验,是个经验丰富的人,却能“手把手”地教我。这两周,光是购买和配制试剂,我就问了他很多问题。不光是实验的操作,就连购买实验用的试剂或质粒都是一个很大的坎,因为你不知道该如何选择,一个小小的失误就会导致金钱的浪费。但现在我已经一一攻克了。

我很高兴。

这两周实验没什么进展,而且培养箱也出了问题,细胞半死不活的。

但我把所有的东西都准备好了:293T细胞、Gibco的Opti-MEM培养基(让监控人员要求高品质,并指定品牌)、确认的质粒拷贝数和病毒载体、转染试剂(我为此纠结了一天)、PEG8000、0.45um滤膜、细菌固液培养基、甘油、包被棒、DH5a感受态细胞、质粒提取盒(我为此纠结了整整一晚)。

班长还给我们提供了两个包装辅助质粒和病毒转染试剂,还教会了我们如何使用摇床。

我了解所有的流程,也准备好了所有需要的东西,但是没有班长的指导我还是很难做到,因为很多时候,知道自己不知道还好,但不知道自己不知道那就是一场灾难。

我甚至觉得自己即将成为一名全面的实验室技术员,这真是令人难以置信。

我把我纯洁的心献给你。

我永远爱你

看法

注意你的呼吸

我感觉我的自我意识减弱了一点。感觉空虚变得非常困难,我的思绪非常混乱。